PROCEDIMIENTO PARA ELABORAR UN MEDIO NUTRITIVO

Procedimiento para elaborar un medio nutritivo

La biotecnología vegetal nos direcciona en nuestros proyectos agropecuarios, para que estos salgan adelante en esta ocasión trataremos el procedimiento para elaborar un medio nutritivo.

A continuación se exponen una secuencia de pasos para la elaboración de 1 L de medio de cultivo.

•Añadir el volumen correcto de cada una de las soluciones de macro y micronutrientes y, demás soluciones a un vaso de precipitado. Para medir volúmenes mayores de 10 ml, usar una probeta volumétrica; los volúmenes pequeños deberán ser medidas con pipetas y utilizando una para cada solución en lo posible, para evitar contaminaciones en las mismas.
• Pesar y añadir el mioinositol si el medio lo requiere.
• Pesar y añadir la sacarosa o el equivalente.
• Enrazar aproximadamente a 900 ml con agua destilada.
• Ajustar el pH.
• Vaciar el medio a una probeta y ajustar el volumen total a un litro.
• Transferir el medio a un envase adecuado.
• Si el medio es solido añadir agar, según la concentración requerida, en caso de ser líquido repartir directamente.
• Diluir el medio en agitador calentador magnético hasta que el medio este transparente.
• A continuación repartir en los frascos de cultivo, taparlos y esterilizarlos en autoclave.
• Colocar los frascos en un lugar limpio, para que se enfríen y solidifiquen si contienen agar.
• Iniciar el cultivo, es preferible emplearlo de la primera semana después de su preparación.

En caso de suplementar los medios de cultivo con sustancias termolábiles, están después de filtradas son añadidas al medio esterilizado, pero menos caliente, se tapa o se agita para hacer la mezcla homogénea.

A continuación se reparte en los recipientes de cultivo anteriormente esterilizados, con cuidado de no mojar la boca del frasco, ya que pueden provocar contaminación. Todo esto se tiene que hacer bajo cámara de flujo laminar.

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Escrito por Wil, el 14 agosto, 2012.


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